熒光-PCR法是利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。PCR反應過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數是呈指數方式增加的，隨著(zhù)反應循環(huán)數的增加，最終PCR反應不再以指數方式生成模板，從而進(jìn)入平臺期。將已知濃度的標準品梯度稀釋進(jìn)行PCR，按照起始DNA量由多到少的順序等間隔得到一系列擴增曲線(xiàn)。Ct值與起始模板數的對數值之間存在線(xiàn)性關(guān)系，可以制作標準曲線(xiàn)。未知濃度的樣品也得到Ct值，代入標準曲線(xiàn)，就可以求出未知樣品的起始模板量。